液相色譜是近年來發展起來的一種高靈敏度、高選擇性的快速分離分析技術。它不僅可用于痕量組分的分析和測定,還可用于大量的制備和分離。它的應用范圍已經超過了其他分離方法,特別是在中藥樣品的分析和分離方面。為該領域的進步和發展做出了巨大貢獻。
液相色譜一般被認為與大容量色譜柱和高流速有關。但是液相色譜的制備不是由設備的大小和系統消耗的流動相的量決定的,而是由分離的目的決定的。液相分析的目的是量化和表征一種成分。制備液相的目的是提取和純化產品的單體。與傳統的純化方法(如蒸餾和萃取)相比,液相的制備是一種更有效的分離方法,因此被廣泛應用于樣品和產品的萃取和純化。隨著合成、生物化學、制藥等領域對高純度組分需求的增加。液相色譜的應用領域正在迅速擴大。
液相色譜儀采用美國先進技術,提供快速高效的大規模分離系統,由并聯泵、具有先進電子電路的紫外-可見檢測器、1200 /mm凹面光柵光路系統、全反向控制工作站等組成。主要用于小型實驗室,天然產物分離,蛋白質的純化和鑒定,有機合成產物的分離和純化,精細化學品的分析,新藥和新化合物的篩選,HPLC樣品預處理。
液相色譜儀的注意事項:
1.流動相過濾后要用超聲波脫氣,使用前要放回室溫。
2.不能用純乙腈做流動相,會卡住止回閥,導致泵不進液。
3.使用緩沖溶液時,樣品完成后立即用去離子水沖洗管道和柱一小時,然后用甲醇(或甲醇水溶液)沖洗40分鐘以上,以充分洗去離子。對于柱塞桿外部,樣品完成后,必須用去離子水沖洗20mL以上。
4.如果長時間不使用儀器,應取出色譜柱,用塞子密封保存。注意,你應該使用有機相而不是純水(例如,甲醇等。),因為純凈水容易發霉。
5.每個樣品完成后,應使用溶解樣品的溶劑清潔進樣器。
6.C18柱不能進入蛋白質樣品、血液樣品和生物樣品。
7.若因堵塞導致壓力過高,則按照預柱混合器中的過濾器管道過濾器止回閥進行檢查和清洗。清潔方法:
以異丙醇為溶劑洗滌;
(2)放入異丙醇中,用超聲波清洗;
用10%稀硝酸清洗;
8.氣泡會造成壓力不穩定,重現性差,使用時盡量避免氣泡。9.如果進液管內沒有液體,用注射器吸出液體:通常情況下,輸液前要清洗流動相。
10.注意色譜柱的pH值范圍,不要進樣強酸強堿樣品,尤其是堿性樣品。
11.更換流動相時,應先將吸濾頭放入燒杯中,邊振邊洗,再插入新的流動相。更換不混溶的流動相時,應使用異丙醇進行過渡。
以上知識僅供參考,希望對你有幫助!
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